LC液相色譜儀由泵將儲(chǔ)液瓶中的溶劑吸入色譜系統(tǒng)，然后輸出，經(jīng)流量與壓力測(cè)量之后，導(dǎo)入進(jìn)樣器。被測(cè)物由進(jìn)樣器注入，并隨流動(dòng)相通過(guò)色譜柱，在柱上進(jìn)行分離后進(jìn)入檢測(cè)器，檢測(cè)信號(hào)由數(shù)據(jù)處理設(shè)備采集與處理，并記錄色譜圖。廢液流入廢液瓶。遇到復(fù)雜的混合物分離(極性范圍比較寬)還可用梯度控制器作梯度洗脫。這和氣相色譜的程序升溫類似，不同的是氣相色譜改變溫度，而LC液相色譜儀改變的是流動(dòng)相極性，使樣品各組分在*條件下得以分離。
LC液相色譜儀使用中常見(jiàn)的問(wèn)題及注意事項(xiàng)
1、過(guò)濾時(shí)有時(shí)會(huì)出現(xiàn)流動(dòng)相漏液。可能的原因是濾膜放置不正確和接頭有點(diǎn)錯(cuò)位，導(dǎo)致流動(dòng)相從縫隙中漏出。
注意：操作時(shí)，應(yīng)先向?yàn)V瓶?jī)?nèi)倒入少量流動(dòng)相，觀察是否漏液并開(kāi)始過(guò)濾，若未漏液，再向?yàn)V瓶中添加流動(dòng)相。
2、超聲時(shí)，瓶外液體的液面應(yīng)高于瓶?jī)?nèi)流動(dòng)相的液面，否則流動(dòng)相內(nèi)的氣體可能無(wú)法排出液體，氣體仍然殘留在流動(dòng)相內(nèi)，以致開(kāi)機(jī)排氣時(shí)無(wú)氣泡排出。
3、開(kāi)機(jī)排氣結(jié)束后，應(yīng)先將流動(dòng)相流量調(diào)小，再關(guān)閉排氣閥，否則會(huì)導(dǎo)致柱壓瞬間升高超過(guò)壓力上限，致使泵停止工作。
4、反相LC液相色譜儀沖洗柱子時(shí)，應(yīng)盡量避免使用純水流動(dòng)相沖洗柱子，因?yàn)樗畼O性強(qiáng)，會(huì)損害色譜柱，導(dǎo)致柱效下降。
5、沖洗色譜柱時(shí)，還可輔助以不同比例的混合流動(dòng)相沖洗色譜柱，以沖出不同極性的殘留物質(zhì)，但zui后還是要用純有機(jī)流動(dòng)相沖洗色譜柱一段時(shí)間。
6、在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)壓力超過(guò)上限或壓力偏高，有可能是柱內(nèi)有殘留物質(zhì)未被沖出，此時(shí)應(yīng)用較大流速的有機(jī)流動(dòng)相充分沖洗色譜柱。若條件允許，也可采用梯度洗脫的方式?jīng)_洗色譜柱。壓力過(guò)高也有可能是濾頭堵塞，此時(shí)可將濾頭取出放到有機(jī)溶劑中超聲。
7、若隔天或更長(zhǎng)時(shí)間不使用LC液相色譜儀，應(yīng)將兩流動(dòng)相瓶中均倒入純的有機(jī)流動(dòng)相（因?yàn)樗鲃?dòng)相長(zhǎng)時(shí)間不用會(huì)滋生細(xì)菌，污染濾頭和色譜柱，導(dǎo)致下次開(kāi)機(jī)使用時(shí)會(huì)出現(xiàn)鬼峰，基線不穩(wěn)）。
8、進(jìn)樣時(shí)所進(jìn)樣品的體積應(yīng)不小于色譜柱的zui大容積，且進(jìn)樣時(shí)注射器里的氣泡一定要排出，不可將氣泡打進(jìn)色譜柱。
